| |
| ■ 制品内容 (20 次量) |
| T4 DNA Polymerase |
20 μl |
| 10×Buffer (含dNTP) |
30 μl |
| DNA Dilution Buffer |
500 μl |
| (100 mM Tris-HCl < pH7.6，16℃> ,5 mM MgCl2) |
| Ligation Solution A* |
600 μl × 2 |
| Ligation Solution B* |
150 μl |
| |
|
| *：Ligation solution A和B与DNA Ligation Kit Ver.1 (Code No.：6021) 通用。 |
|
| |
| ■ 制品说明 |
DNA Blunting Kit可使具有3’或5’突出末端的DNA平滑化。在T4 DNA Polymerase 5’→3’的聚合酶活性和3’→5’的外切酶活性的作用下，两种不同形式的粘性末端可被同时平滑化。再使用本试剂盒中的连接液即可高效地将得到的平末端DNA与平末端载体相连。并且反应液不需纯化，可以直接用于细菌转化和体外包装等。
本试剂盒也可将载体DNA的末端平滑化。经平滑化后的载体DNA再进行去磷酸化后使用。
很多PCR产物都含有3’-dA末端，因而不能有效连入载体。如果使用本试剂盒将此类PCR产物末端平滑化，再根据实际情况进行磷酸化处理，就可以有效地连入平末端载体。
|
| |
| ■ 保存 |
| -20℃。 |
| |
|
| ■ DNA末端平滑化原理 |
|
| |
| ■ 使用注意 |
1. 本试剂盒可使具有去磷酸化的5’突出末端的DNA末端平滑，但不能使磷酸化的3’凹陷末端的DNA末端平滑。在鸟枪法克隆时，应注意超声波分解的DNA片段，可能会产生具有磷酸化的3’凹陷末端的DNA片段。
2. Ligation Solution A和B置于冰中融解，使用前快速混匀。
3. 做细菌转化时，连接液不需要做苯酚抽提便可直接使用。如果有必要浓缩，可用乙醇沉淀法精制DNA。 |
| |
| |
京公网安备 110114000405号