金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) 是一种存在于人、动物皮肤和消化道中的病原菌，其在食物中繁殖产生的肠毒素可引起食物中毒。本制品是以在菌种间具有多样性的管家基因DnaJ为目的基因，使用Real Time PCR方法对金黄色葡萄球菌进行检测的试剂盒。
制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，可以有效地抑制在配制反应液时发生的引物错配及引物二聚体引起的非特异性PCR扩增，大大提高PCR的检测灵敏度。
本制品采用Cycling Probe法进行检测，Cycling Probe法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检出法，能够高效率地检出扩增过程中及扩增结束时的目的基因片段。Cycling Probe内部含有RNA碱基，一端标记荧光物质，另一端标记荧光淬灭物质，当探针处于完整状态时，由于荧光淬灭作用抑制荧光物质发出荧光，但当探针与扩增产物中的互补序列杂交后，RNase H在RNA部分将探针切断，淬灭抑制作用解除，荧光物质发出荧光。通过测定荧光强度，能够实时监控扩增产物量。
制品中金黄色葡萄菌的DnaJ基因用FAM标记，内参照 (Internal Control) 检测用ROX标记探针。在同一反应管内可以对DnaJ基因及内参照同时进行扩增，通过两种不同荧光标记的探针可以对DnaJ基因及内参照同时检出。其中，对内参照反应的检测，可以监控反应是否正常进行，防止假阴性结果。本检测无需电泳，简单快速，灵敏度高，特异性好。 |